Метод ПЦР и его применение в геномных исследованиях.
Ключевые слова:
ПЦР, ДНК, амплификация, праймер, денатурация, элонгация, геномикаАннотация
В данной статье анализируются теоретические основы метода полимеразной цепной реакции (ПЦР), механизм его действия и роль в геномных исследованиях на основе современных научных подходов. Технология ПЦР широко используется в молекулярной биологии и генетике как высокочувствительный и точный метод, позволяющий амплифицировать специфические фрагменты ДНК in vitro. В статье подробно описаны основные этапы процесса ПЦР — денатурация, отжиг праймеров и элонгация — и объяснена важность каждого из них в геномном анализе.
Библиографические ссылки
Mullis K.B., Faloona F.A. Specific synthesis of DNA in vitro via a polymerase-catalyzed chain reaction. Methods in Enzymology. 1987.
Saiki R.K., Gelfand D.H., Stoffel S., Scharf S.J., Higuchi R., Horn G.T., Mullis K.B., Erlich H.A. Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase. Science. 1988; 239:487–491.
Bustin S.A., Benes V., Garson J.A., Hellemans J., Huggett J., Kubista M., Mueller R., Nolan T., Pfaffl M.W., Shipley G.L., Vandesompele J., Wittwer C.T. The MIQE guidelines: Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiments. Clinical Chemistry. 2009; 55(4):611–622.
Huggett J.F., Foy C.A., Benes V., Emslie K., Garson J.A., Haynes R., Hellemans J., Kubista M., Mueller R.D., Nolan T., Pfaffl M.W., Shipley G.L., Vandesompele J., Wittwer C.T., Bustin S.A. The digital MIQE guidelines: Minimum information for publication of quantitative digital PCR experiments. Clinical Chemistry. 2013; 59(6):892–902.
Zhu H., Fohlerova Z., Pekarek J., Basova E., Neuzil P. Recent advances in PCR technology: Current applications and future directions. Biotechniques. 2020; 69(4):317–325.
Sidstedt M., Rådström P., Hedman J. PCR inhibition in qPCR, dPCR and MPS—Mechanisms and solutions. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 2020; 412:2009–2023.
Ma H., Bryukhovetskiy I., Nuttall J., et al. qPCR and qRT-PCR analysis: Regulatory points to consider. International Journal of Molecular Sciences. 2021; 22(2).
Doudna J.A., Charpentier E. The new frontier of genome engineering with CRISPR-Cas9. Science. 2014; 346(6213).
Brown T.A. Genomes 4. Garland Science, 2018.
Alberts B., Johnson A., Lewis J., Morgan D., Raff M., Roberts K., Walter P. Molecular Biology of the Cell. 6th ed. Garland Science, 2015.
(+998)90 142-39-38
m.z.abdutolibov@gmail.com
@universal_jurnal
Андижанская область, Мархаматский район, ул. Кашкар 189